Die helicase-dependent amplification (HDA, engl. für ‚Helikase-abhängige Amplifikation‘) ist eine Methode zur Amplifikation (Vervielfältigung) von DNA. Sie ist eine Variante der isothermalen DNA-Amplifikation.
Eigenschaften
Die recombinase polymerase amplification verwendet eine Helikase (TteUvrD, Helikase-Superfamilie II, aus Thermoanaerobacter tengcongensis, jetzt Unterart von Caldanaerobacter subterraneus), ein Einzelstrang-bindendes Protein und eine strangversetzende DNA-Polymerase. Durch die Verwendung einer strangversetzenden DNA-Polymerase kann die Reaktion bei einer konstanten Temperatur von 37 bis 42°C erfolgen, bei Raumtemperatur verläuft die Reaktion etwas langsamer. Analog zur qPCR kann die HDA auch zur Quantifizierung von DNA verwendet werden. Analog zur Multiplex-PCR können mehrere Sequenzen parallel vervielfältigt werden.
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