RxYFP

rxYFP (Abkürzung für englisch Redox-sensitive YFP) ist eine veränderte Variante des grün fluoreszierenden Proteins, bei der sich die Fluoreszenz redox-abhängig ändert.

Eigenschaften

rxYFP besitzt im Vergleich zur Wildtyp-Form des GFP zwei oxidierbare Cysteine. Durch Oxidation der Thiolgruppen der Cysteine wird Cystin gebildet, was sich in einer Minderung der Fluoreszenz des rxYFP auswirkt.

Anwendungen

Das rxYFP wird unter anderem als redox-abhängiger Biosensor und als Reporterprotein verwendet. Mit rxYFP kann das Redox-Potential und die Menge an Glutathion im Zytosol oder im Zellkern in vivo bestimmt werden.

Alternative optische Nachweisverfahren verwenden z. B. Resazurin (synonym AlamarBlue), Dichlorofluorescein (DCF) oder die Proteine HyPer oder roGFP.

Einzelnachweise

↑ H. Østergaard, C. Tachibana, J. R. Winther: Monitoring disulfide bond formation in the eukaryotic cytosol. In: The Journal of Cell Biology. Band 166, Nummer 3, August 2004, S. 337–345, ISSN 0021-9525. doi:10.1083/jcb.200402120. PMID 15277542. PMC 2172265 (freier Volltext).
↑ K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: Genetically encoded fluorescent redox sensors. In: Biochimica et Biophysica Acta. Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S. 745–756, ISSN 0006-3002. doi:10.1016/j.bbagen.2013.05.030 (freier Volltext). PMID 23726987.
↑ M. Dardalhon, C. Kumar, I. Iraqui, L. Vernis, G. Kienda, A. Banach-Latapy, T. He, R. Chanet, G. Faye, C. E. Outten, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors monitor dynamic nuclear and cytosolic glutathione redox changes. In: Free radical biology & medicine. Band 52, Nummer 11–12, 2012 Jun 1-15, S. 2254–2265, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2012.04.004. PMID 22561702. PMC 3382975 (freier Volltext).
↑ A. Banach-Latapy, T. He, M. Dardalhon, L. Vernis, R. Chanet, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors for monitoring dynamic compartment-specific glutathione redox state. In: Free Radical Biology and Medicine. Band 65, Dezember 2013, S. 436–445, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2013.07.033. PMID 23891676.
↑ S. Pouvreau: Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators. In: Biotechnology journal. Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S. 282–293, ISSN 1860-7314. doi:10.1002/biot.201300199. PMID 24497389.

[1] H. Østergaard, C. Tachibana, J. R. Winther: Monitoring disulfide bond formation in the eukaryotic cytosol. In: The Journal of Cell Biology. Band 166, Nummer 3, August 2004, S. 337–345, ISSN 0021-9525. doi:10.1083/jcb.200402120. PMID 15277542. PMC 2172265 (freier Volltext).

[2] K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: Genetically encoded fluorescent redox sensors. In: Biochimica et Biophysica Acta. Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S. 745–756, ISSN 0006-3002. doi:10.1016/j.bbagen.2013.05.030 (freier Volltext). PMID 23726987.

[3] M. Dardalhon, C. Kumar, I. Iraqui, L. Vernis, G. Kienda, A. Banach-Latapy, T. He, R. Chanet, G. Faye, C. E. Outten, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors monitor dynamic nuclear and cytosolic glutathione redox changes. In: Free radical biology & medicine. Band 52, Nummer 11–12, 2012 Jun 1-15, S. 2254–2265, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2012.04.004. PMID 22561702. PMC 3382975 (freier Volltext).

[4] A. Banach-Latapy, T. He, M. Dardalhon, L. Vernis, R. Chanet, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors for monitoring dynamic compartment-specific glutathione redox state. In: Free Radical Biology and Medicine. Band 65, Dezember 2013, S. 436–445, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2013.07.033. PMID 23891676.

[5] S. Pouvreau: Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators. In: Biotechnology journal. Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S. 282–293, ISSN 1860-7314. doi:10.1002/biot.201300199. PMID 24497389.