Entsyymikinetiikka tarkastelee entsyymin kinetiikkaa eli toiminnan nopeutta. Entsyymikinetiikkaa tutkittaessa tutkitaan entsyymin katalyyttistä aktiivisuutta eli katalysointikykyä. Entsyymin reagoidessa substraatin kanssa ensin syntyy entsyymi-substraattikompleksi, joka sitten jakaantuu entsyymiksi ja lopputuotteeksi. Kompleksin muodostuminen tapahtuu nopeammin kuin sen jakaantuminen. Kun entsyymi on kyllästynyt substraatin suhteen, sen katalyyttinen aktiivisuus on suurimmillaan. Mitä suurempi on aineen substraattipitoisuus, sitä nopeammin tapahtuu entsyymin nopeuttama reaktio. Entsyymikinetiikkaa esitetään Michaelis-Mentenin yhtälön avulla. Substraattipitoisuuteen puolestaan liittyy Michaelis-Mentenin vakio.