L-forma baktérium

Bacillus subtilis L-formájának transzmissziós elektronmikroszkópos felvétele. A skála beosztása 500 nanométeres.

Az L-forma baktérium (baktériumok L-formája), az angol nyelvű szakirodalomban még: L-phase bacteria, L-phase variants vagy cell wall deficient (CWD) bacteria kifejezés olyan baktériumtörzsre utal, aminek hiányzik a sejtfala. Emmy Klieneberger-Nobel német származású mikrobiológus izolálta őket elsőként 1935-ben, és adta nekik az „L-forms” (L-formák) nevet, munkahelye, a londoni Lister Institute után.

Két fajtáját különböztetik meg: az instabil L-formák vagy szferoplasztok osztódásra képesek, de képesek visszaalakulni sejtfallal rendelkező formára, és a stabil L-formák, amik visszaalakulásra nem képesek.

Egyes parazita életmódú baktériumokból, mint a fitoplazma vagy a mikoplazma szintén hiányzik a sejtfal, de ezeket nem tekintik L-formáknak, mivel nem egyébként sejtfallal rendelkező baktériumok különleges alakváltozatai.

Megjelenés, sejtosztódás

Különböző méretű Bacillus subtilis L-formák transzmissziós elektronmikroszkópos felvétele. A skála beosztása 10 mikrométeres.

A baktériumok morfológiáját a sejtfal határozza meg. Mivel az L-formák nem rendelkeznek sejtfallal, alakjuk eltér a baktériumtörzsétől, amelyből erednek, tipikusan gömb vagy szferoid. Például a pálcika alakú Bacillus subtilis fáziskontraszt-mikroszkóp vagy transzmissziós elektronmikroszkóp alatt kerek formájúnak látszik.

Bár L-formák Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumokból egyaránt kialakulhatnak, a Gram-festés során az L-formák mindig Gram-negatív eredményt adnak a sejtfal hiánya miatt.

A sejtfalnak fontos szerepe van a sejtosztódásban is, ami a legtöbb baktérium esetében kettéosztódással (bináris hasadás) történik. Az L-formák esetén a sejtfal hiánya miatt a sejtosztódás szervezetlen, így az osztódás során a nagyon aprótól a nagyon nagyig különböző méretű sejtek jönnek létre.

Bacillus subtilis L-forma sejtjeinek fáziskontraszt-képe. A skála beosztása 5 mikrométeres.

A bakteriális sejtosztódás általában megköveteli a sejtfal, és a bakteriális sejtváz minden komponensének (mint pl. az FtsZ) jelenlétét. Az L-forma baktériumok képessége, hogy ezek nélkül is növekedjenek és osztódjanak merőben szokatlan, és talán egy az élet fejlődésének korábbi szakaszaiban működő sejtosztódási formát képvisel. Ennek a sejtosztódási formának sajátossága, hogy vékony kitüremkedések alakulnak ki a sejt felületén, amik aztán leválnak, hogy új sejteket alkossanak.

Létrehozás kultúrában

L-formákat laboratóriumi körülmények között is létre lehet hozni egyébként sejtfallal rendelkező fajokból, mint a Bacillus subtilis vagy az Escherichia coli. Ez történhet a peptidoglikán-szintézis antibiotikummal való gátlásával, vagy a sejtfalat emésztő lizozim enzimmel való kezelés útján. Az L-formákat olyan tápközegben kell nevelni, aminek az ozmolalitása megegyező a baktérium citoszoljáéval (sejtfolyadék), azaz izotonikus oldat. Ez megakadályozza az ozmotikus sokk kialakulását. A L-formák törzsei instabilak is lehetnek, azaz visszanöveszthetik a sejtfalukat. Ez megakadályozható, ha hosszú ideig azonos körülmények között tartják a baktériumkultúrát.

Egyes kutatóknak sikerült az L-formák létrejöttekor történő mutációkat azonosítani. Az egyik ilyen pontmutáció a lipidanyagcsere mevalonát-anyagcsereútjának egy enzimével kapcsolatos, és az L-formák létrejöttének gyakoriságát mintegy ezerszeresére növelte. Ennek hatásmechanizmusa nem ismert, de köze lehet az enzim szerepéhez egy a peptidoglikán-szintézisben fontos lipid előállításában.

Egy másik módszer a nanotechnológia felhasználása. Mikrofluidikai eszközöket építve a peptidoglikán szintézisét a rendelkezésre álló tér korlátozásával akadályozni lehet. Egy szomszédos mikroélőhelyfoltokat és bakteriális metapopulációkat összekötő, szűk (nagyságrendileg mikrométeresnél kisebb) biológiai folyosón („vadátjárón”) keresztül történő szétszóródás után az L-formához hasonló sejtek nyerhetők.

Jelentőségük, alkalmazásaik

Az L-forma baktériumok kutatása hasznos lehet az élet ősi formáinak kutatásában és a biotechnológiában.

A laboratóriumban létrehozott L-forma baktériumtörzsek létezését a természetben nem sikerült igazolni. Egyes publikációk humánpatogén L-forma baktériumok létezése mellett érveltek, de a betegség és ezen életformák közötti kapcsolat töredékes és gyakran ellentmondásos, ezért az elmélet vitatott maradt.

A kérdésben a két végletes álláspont szerint az L-forma baktériumok vagy mindössze laboratóriumi látványosságok, vagy betegségek fontos, fel nem ismert okozói. Az L-forma baktériumok kutatása folytatódik, például L-forma szervezeteket figyeltek meg egerek tüdejében, miután egy kísérletben Nocardia caviae-vel oltották be őket, és egy tanulmány szerint az L-formák megfertőzhetnek olyan immunszupresszív gyógyszerekkel kezelt pácienseket, akik csontvelő-átültetésen estek át. A sejtfal nélküli baktériumtörzsek kialakulása fontos lépés lehet a gyógyszerrezisztens baktériumok kialakulásában is.

Vizsgálják az L-forma baktériumok biotechnológiai felhasználásának lehetőségét a fehérjetermelés eszközeiként. Itt a sejtfal hiánya kimondottan előnyös, mivel nagy mennyiségű fehérje termelését teszi lehetővé, amik egyébként a sejthártya és a külső membrán közötti periplazmatikus térben gyűlnének fel. A periplazmatikus térben toxikus mennyiségben felgyűlhetnek a fehérjék, ami csökkentheti a kiválasztott fehérjék hozamát.

Lásd még

Ajánlott irodalom

Jegyzetek

  1. 1 2 3 4 Leaver M, Domínguez-Cuevas P, Coxhead JM, Daniel RA, Errington J (2009). "Life without a wall or division machine in Bacillus subtilis". Nature. 457 (7231): 849–53. doi:10.1038/nature07742. PMID 19212404. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  2. 1 2 3 Joseleau-Petit D, Liébart JC, Ayala JA, D'Ari R (2007). "Unstable Escherichia coli L forms revisited: growth requires peptidoglycan synthesis". J. Bacteriol. 189 (18): 6512–20. doi:10.1128/JB.00273-07. PMC 2045188. PMID 17586646. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  3. ↑ Razin S, Yogev D, Naot Y (1998). "Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas". Microbiol. Mol. Biol. Rev. 62 (4): 1094–156. PMC 98941. PMID 9841667. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  4. 1 2 Domingue GJ, Woody HB (1997). "Bacterial persistence and expression of disease". Clin. Microbiol. Rev. 10 (2): 320–44. PMC 172922. PMID 9105757. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó) Full PDF
  5. ↑ Gilpin RW, Young FE, Chatterjee AN (1973). "Characterization of a stable L-form of Bacillus subtilis 168". J. Bacteriol. 113 (1): 486–99. PMC 251652. PMID 4631836. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  6. ↑ Allan EJ (1991). "Induction and cultivation of a stable L-form of Bacillus subtilis". J. Appl. Bacteriol. 70 (4): 339–43. PMID 1905284. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)
  7. ↑ Männik J., R. Driessen, P. Galajda, J.E. Keymer, C. Dekker (2009). "Bacterial growth and motility in sub-micron constrictions". PNAS. 106 (35): 14861–14866. doi:10.1073/pnas.0907542106. PMC 2729279. PMID 19706420. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  8. ↑ Onwuamaegbu ME, Belcher RA, Soare C (2005). "Cell wall-deficient bacteria as a cause of infections: a review of the clinical significance" (PDF). J. Int. Med. Res. 33 (1): 1–20. PMID 15651712. 2009. augusztus 24. dátummal az eredeti (PDF) címről archiválva. Hozzáférés: 2009. március 16.{{cite journal}}: CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  9. ↑ Casadesús J (2007). "Bacterial L-forms require peptidoglycan synthesis for cell division". Bioessays. 29 (12): 1189–91. doi:10.1002/bies.20680. PMID 18008373. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)
  10. ↑ Beaman BL (1980). "Induction of L-phase variants of Nocardia caviae within intact murine lungs". Infect. Immun. 29 (1): 244–51. PMC 551102. PMID 7399704. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)
  11. ↑ Beaman BL, Scates SM (1981). "Role of L-forms of Nocardia caviae in the development of chronic mycetomas in normal and immunodeficient murine models". Infect. Immun. 33 (3): 893–907. PMC 350795. PMID 7287189. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)
  12. ↑ Woo PC, Wong SS, Lum PN, Hui WT, Yuen KY (2001). "Cell-wall-deficient bacteria and culture-negative febrile episodes in bone-marrow-transplant recipients". Lancet. 357 (9257): 675–9. doi:10.1016/S0140-6736(00)04131-3. PMID 11247551. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  13. ↑ Fuller E, Elmer C, Nattress F; et al. (2005). "Beta-lactam resistance in Staphylococcus aureus cells that do not require a cell wall for integrity". Antimicrob. Agents Chemother. 49 (12): 5075–80. doi:10.1128/AAC.49.12.5075-5080.2005. PMC 1315936. PMID 16304175. 2009. május 29. dátummal az eredeti címről archiválva. Hozzáférés: 2010. augusztus 15. {{cite journal}}: Explicit use of et al. in: |author= (súgó); Unknown parameter |month= ignored (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  14. ↑ Gumpert J, Hoischen C (1998). "Use of cell wall-less bacteria (L-forms) for efficient expression and secretion of heterologous gene products". Curr. Opin. Biotechnol. 9 (5): 506–9. doi:10.1016/S0958-1669(98)80037-2. PMID 9821280. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)
  15. ↑ Rippmann JF, Klein M, Hoischen C; et al. (1998. december 1.). "Procaryotic expression of single-chain variable-fragment (scFv) antibodies: secretion in L-form cells of Proteus mirabilis leads to active product and overcomes the limitations of periplasmic expression in Escherichia coli". Appl. Environ. Microbiol. 64 (12): 4862–9. PMC 90935. PMID 9835575. {{cite journal}}: Explicit use of et al. in: |author= (súgó)CS1 karbantartás: több név: szerzőfelsorolás (link)
  16. ↑ Choi JH, Lee SY (2004). "Secretory and extracellular production of recombinant proteins using Escherichia coli". Appl. Microbiol. Biotechnol. 64 (5): 625–35. doi:10.1007/s00253-004-1559-9. PMID 14966662. {{cite journal}}: Unknown parameter |month= ignored (súgó)

Fordítás