Lucienne Moreau a été veilleuse de nuit dans la première partie de sa vie professionnelle.
À presque soixante ans, en 1992, elle s'installe à Argenteuil, près de Paris. C'est là que, vers l'an 2000 et d'après son propre témoignage, elle a répondu à une annonce dans un journal gratuit pour faire des photos, puis de fil en aiguille s'est vu offrir des rôles de plus en plus importants.
L'agence de mannequin seniors Masters Models et l'agence de publicité Leg l'ont notamment mise en scène dans une affiche publicitaire pour Eurostar.
Elle a ensuite joué des rôles secondaires au cinéma et à la télévision, puis de plus grands rôles, en particulier dans Groland. En , elle est reconnue du grand public grâce à l'émission Le Petit Journal de Canal+ qui l'a érigée en vedette avec sa propre rubrique «The Lucienne Live Report» dans laquelle elle porte un regard satirique sur les soirées de la jet set parisienne.
En , elle participe au LOL Project de David Ken en se déguisant en Mère Noël.
Pendant les vacances de Noël 2010-2011, elle apparaît sur le plateau du Petit Journal de Canal+ aux côtés de Yann Barthès pour une nouvelle rubrique «Lucienne a lu», satire de la littérature people et politique.
Le , à l'âge de 81 ans, elle participe à l'émission Fort Boyard pour une diffusion le sur France 2, ce qui fait d'elle la doyenne des participants depuis la création du jeu
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